3)官颈粘液生化因素:体外试验表面，精子存活与官颈粘液中葡萄橢含量有关，已发现某些不孕妇女的宫颈粘液中糖含量低，估计有些无法解释的宫颈粘液-精子不相容可能与此有关。
2.体外试验精子和宫颈粘液相互作用可用体外宫颈粘液穿透试验进行详细评价。有3种主要的试验方法:①玻片试验;②精子-宫颈粘液接触试验;③毛细管试验。前两项试验技术简单，并提供有用的资料，故作为常规检测精液质量的方法介绍如下:
体外试验必须用射精后1小时内的新鲜精液。
注:如采集人类宫颈粘液有困难时，可用牛动情期官颈粘液作为代替品，但不能用于不有症的研究(Moghisi, 1984)。 这两种分泌物的理化性质相似:在体外，人类精子很容易穿透牛官颈粘液，穿透程度与人官颈粘液相同，也能保持良好的话力井存活数小时。有人为了避免试验的不标准化，而采用合成凝胶来代替小牛官颈粘液。
(1)玻片试验 滴一滴官颈粘液在玻片上，加盖盖玻片(25mm x0m)使铺平。玻片两侧各滴滴精液，使与盖玻片边缘接触，借毛细作用精液移向盖玻片下。这样就在宫颈粘液和精液之间获得-清晰的接触界面。
精液在接触界面几分钟内即形成一些只状凸起通道。在很多情况下，似乎是一个为旦进人宫颈粘液，精子群便呈扇形散开并随意游动。有些精子返回精浆层，大多数都继续向言颈粘液深处游动，直至遇到细胞碎片或白细胞的阻力才停止。在评价试验结果时只计算分界面每高倍视野下的精子数，而不计指状凸起部分中的精子数。只有那些显然进人宫颈粘液中的精子，才视作已完成穿透。为定量评价结果，自接触界面开始的第一个显微镜视野称为F1 (放大400倍)，在试验开始后5及15分钟计算F1中的精子数。每次试验都需记录放大倍数。为 Sp:精子; 1-F: 宫颈粘液-精液接触面;研究穿透深度，紧临第一视野的第二显微镜视野称为(F2)与第三视野(F3)也可加以评价，即记录其精子数。
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